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抗原抗體檢測(cè)方法知多少
發(fā)布日期:2022/12/6 11:10:49
1、抗原抗體的認(rèn)識(shí)
抗原(antigen,Ag)是指能與T細(xì)胞、B細(xì)胞抗原受體或抗體特異性結(jié)合,具有啟動(dòng)免疫應(yīng)答潛能的物質(zhì)。抗原分子表面具有特殊立體構(gòu)型和免疫活性的化學(xué)基團(tuán)或區(qū)域稱為抗原決定簇,又稱抗原表位(Epitope)。機(jī)體的免疫應(yīng)答針對(duì)的是抗原表位,它們也是與抗體相結(jié)合的部位,我們又稱為抗原表位。

抗體(Ig)是由抗原刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)后產(chǎn)生,并能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。抗體具有空間結(jié)構(gòu),也具有抗原決定簇,還可被其他蛋白(如二抗)結(jié)合。

 2、抗原抗體的一些蛋白質(zhì)性質(zhì)

抗原和抗體均屬于蛋白質(zhì);

蛋白質(zhì)之間存在相互作用,抗原和抗體的結(jié)合本質(zhì)上屬于蛋白質(zhì)的相互作用;

所有的蛋白都具有空間結(jié)構(gòu);

任何蛋白質(zhì)均是一種抗原,抗原和抗體是相對(duì)的概念。

〖 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)) 〗

1、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))的介紹 

ELISA是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,它將抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)與酶反應(yīng)的敏感性相結(jié)合,在抗原抗體結(jié)合的過(guò)程中通過(guò)在抗原或抗體上標(biāo)記酶,酶和底物的結(jié)合使反應(yīng)液吸光值發(fā)生改變,吸光值可被機(jī)器識(shí)別,機(jī)器將吸光值的變化經(jīng)公式轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào),ELISA被廣泛應(yīng)用在液體樣本中的病原、抗體、激素等有機(jī)物質(zhì)的測(cè)定中。

2、ELISA的分類

3、ELISA的原理

它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接,然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測(cè)定。測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。

在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:

①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) 

②酶標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)

③酶作用的底物(顯色劑)

利用ELISA測(cè)量時(shí),抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,免疫活性保留,加入一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物也保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)二者反應(yīng)結(jié)合后,被酶催化水解或氧化還原而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測(cè)的抗原(抗體)含量成正比。 生成產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測(cè)定,簡(jiǎn)單迅速,特異性強(qiáng)。

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